Uji potensi dan keamanan vaksin
ditandai dengan penggunaan hewan laboratorium secara ekstensif dan persentase
pengujian yang relatif tinggi metode yang melibatkan rasa sakit dan kesusahan
yang parah. Hal ini terutama berlaku untuk tes yang didasarkan pada infeksi
atau tantangan dengan amikroorganisme virulen. Secara tradisional, tes potensi
vaksin pada vaksin yang tidak aktif memerlukan prosedur tantangan vaksinasi menggunakan
tanda-tanda klinis yang parah atau bahkan mematikan sebagai titik akhir.
Untuk beberapa vaksin ini, metode
3R telah dikembangkan yang mencakup titik akhir nonklinis, yang pada akhirnya
menghasilkan:
pengurangan jumlah hewan dan
penurunan tingkat keparahan yang signifikan. Contohnya adalah penggunaan
serologi dalam pengujian potensi vaksin toksoid tetanus dan difteri.
Untuk beberapa uji potensi,
bagaimanapun, penggantian prosedur tantangan tidak (belum) memungkinkan, dan
penerapan manusiawi titik akhir mungkin merupakan pendekatan untuk membatasi
tingkat dan durasi rasa sakit dan kesusahan. Penerapan titik akhir ini sekarang
diperbolehkan di sebagian besar farmakope.
Menetapkan titik akhir yang
manusiawi dalam pengujian potensi vaksin memerlukan identifikasi parameter yang
dapat memprediksi kematian, atau gejala klinis yang parah, pada hewan selama
periode pengamatan. Sebagai studi kasus, kami menyajikan hasil pekerjaan yang
kami lakukan pada identifikasi titik akhir manusiawi dalam pengujian potensi
vaksin whole cell pertussis (wP) (tes perlindungan tikus atau Tes Kendrick).
Pada uji potensi ini, mencit ditantang dengan rute intraserebral 14 hari
setelah imunisasi dengan dosis letal mikroorganisme virulen B. pertussis. Hewan
diamati selama 14 hari, dan jumlah tikus per kelompok dosis yang bertahan hidup
selama ini periode digunakan untuk analisis probit dan estimasi potensi.
Kami telah mempelajari dua jenis
titik akhir manusiawi: tanda klinis dan parameter patofisiologis (berat badan
dan suhu tubuh). Tanda-tanda klinis dalam uji potensi wP berkisar dari
piloereksi, postur bungkuk, apatis, dan kejang-kejang hingga kondisi sekarat.
Juga suhu tubuh turun, dan hewan kehilangan hingga 50% dari berat badan mereka
pasca-tantangan.
Parameter "divalidasi"
untuk relevansi (prediksi kematian dalam periode pengamatan) dan reliabilitas.
Rekomendasi diberikan untuk penerapan titik akhir yang manusiawi dalam
pengujian potensi vaksin, juga dengan mempertimbangkan potensi hambatan.
Pengantar Bahasan
Penyempurnaan prosedur hewan
adalah salah satu prinsip etika terkemuka dalam penelitian biomedis ketika
hewan alternatif pengganti tidak tersedia. Dari sudut pandang kesejahteraan
hewan, prioritas harus diberikan kepada mereka yang prosedur yang melibatkan
rasa sakit dan penderitaan yang parah. Menurut statistik penggunaan hewan
laboratorium di Belanda, salah satu dari sedikit negara yang menyimpan
statistik tingkat keparahan, 11,3% dari semua hasil eksperimen hewan
dalam tanda-tanda klinis yang
parah, penderitaan yang parah, atau bahkan mematikan.
Strategi penting untuk membatasi
tingkat dan/atau durasi keparahan adalah penerapan titik akhir yang manusiawi.
Sebuah titik akhir manusiawi dapat didefinisikan sebagai ''Indikator paling
awal dalam percobaan hewan tentang (potensial) rasa sakit dan/atau' kesusahan
yang, dalam konteks ilmiah dan penerimaan moralnya, dapat digunakan untuk
menghindari atau membatasi konsekuensi tersebut dengan: mengambil tindakan
seperti membunuh secara manusiawi atau mengakhiri atau mengurangi rasa sakit
dan kesusahan”
Peraturan yang ada tentang
penggunaan hewan laboratorium dalam penelitian biomedis mempromosikan penerapan
manusiawi titik akhir. Misalnya, Pasal 13.3 dari peraturan yang direvisi
baru-baru ini tentang eksperimen hewan di Uni Eropa menyatakan bahwa “Kematian
sebagai titik akhir harus dihindari sejauh mungkin dan diganti dengan lebih
awal dan titik akhir yang manusiawi”
Titik akhir yang manusiawi adalah
kasus khusus dan berbeda tergantung pada jenis penelitian dan bahkan pada jenis
percobaan atau model hewan yang digunakan. Naskah ini akan fokus pada
identifikasi titik akhir manusiawi di pengujian potensi vaksin, menggunakan
vaksin whole cell pertussis (wP) untuk menggambarkan kemungkinan dan
keterbatasan.
Simpulan Diskusi
Dalam penelitian yang disajikan,
kami menunjukkan bahwa tahapan tertentu untuk suhu tubuh dan tanda-tanda klinis
keduanya relevan dan dapat diandalkan untuk menggantikan kematian sebagai titik
akhir dalam uji potensi vaksin wP. Namun, itu harus disimpan di ingat bahwa
titik akhir umumnya tidak dapat ditransfer seperti itu ke model hewan lainnya.
Jadi, dalam penelitian kami, menggunakan wP uji potensi sebagai studi kasus,
berat badan tampaknya bukan titik akhir yang valid, sementara pada model hewan
lain, seperti untuk pengujian potensi rabies, berat badan tampaknya dapat
memprediksi kematian.
Berkenaan dengan berat badan,
misalnya, menggunakan interval 2 gram dalam kisaran penurunan berat badan 30%
hingga 50% dapat lebih menyempurnakan tahap titik akhir. Juga, menggabungkan
penilaian untuk dua titik akhir dapat memperbaiki prediktif.
Mengenai prediktif, sebagian
besar farmakope sekarang menerima penggunaan titik akhir yang manusiawi. Namun,
informal penyelidikan produsen vaksin, dilakukan oleh HELP beberapa tahun
setelah farmakope mengizinkan penggunaan titik akhir yang manusiawi,
menunjukkan bahwa beberapa produsen benar-benar telah menerapkan strategi titik
akhir yang manusiawi (data tidak dipublikasikan). Meskipun alasan keengganan
mungkin beragam, beberapa kemungkinan disarankan di bawah ini:
• Tanda-tanda klinis umumnya
bersifat subjektif, dan perbedaan interpretasi mungkin terjadi di antara pengamat.
• Menggunakan titik akhir yang
manusiawi menyiratkan bahwa hewan harus diamati lebih sering daripada hanya
sekali sehari, yang akan meningkatkan biaya tenaga kerja percobaan.
• Titik akhir yang manusiawi
adalah model yang spesifik. Akibatnya, untuk setiap produk, studi harus dilakukan
untuk mengidentifikasi titik akhir yang manusiawi dan untuk memvalidasi
prediktif.
• Meskipun penggunaan titik akhir
yang manusiawi telah diterapkan di sebagian besar farmakope (tanpa persyaratan),
otoritas pengatur di masing-masing negara mungkin masih mematuhi hasil yang
diperoleh dengan cara mematikan tantangan. Produsen akan bereaksi terhadap
keragaman spesifikasi dengan memberikan hasil yang menantang.
Tidak semua kendala yang
tercantum mudah untuk diatasi. Penerimaan internasional dari titik akhir yang
manusiawi akan membutuhkan harmonisasi atau saling pengakuan persyaratan
pengujian. Meskipun ini telah menjadi topik utama diskusi selama ini beberapa
waktu, sedikit kemajuan telah dibuat. Argumen dapat berhasil dibuat untuk
mendukung penerapan manusiawi titik akhir, termasuk fakta bahwa biaya tambahan
terbatas dan subjektivitas pemantauan tanda-tanda klinis dapat dihindari dengan
pelatihan tambahan di tempat. Informasi tentang titik akhir manusiawi dan
tanda-tanda klinis akan diberikan segera di situs web:
www.humane-endpoints.info, yang merupakan situs web Department of Animals in
Science dan Perhimpunan Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Utrecht.
Menerapkan titik akhir manusiawi
dalam pengendalian kualitas vaksin tidak menghasilkan manfaat ilmiah atau
ekonomi keuntungan tetapi merupakan masalah perawatan manusiawi dan, akibatnya,
etika. Meskipun tidak bertanggung jawab, otoritas pengatur dapat berperan dalam
mendorong penerapan titik akhir yang manusiawi saat meninjau pengajuan produsen
untuk pelepasan lot berdasarkan titik akhir tantangan mematikan.